賽默飛Thermo LightCycler® 480 II 實時熒光定量PCR儀介紹

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）的LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀是一款高性能、多功能的PCR檢測儀器，專為基因表達研究、基因分型、拷貝數(shù)變異分析、突變檢測等實驗需求而設計。作為分子生物學研究中廣泛應用的儀器之一，LightCycler® 480 II以其高通量、高靈敏度、強大的多重檢測能力以及快速熱循環(huán)技術，在科研、臨床和工業(yè)檢測領域表現(xiàn)出色。

一、儀器概述

LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀結(jié)合了先進的光學檢測系統(tǒng)與快速溫控技術，是一款為高精確度核酸定量分析而設計的設備。該儀器支持96孔和384孔反應板，能夠適應不同規(guī)模的實驗需求，同時以其出色的熒光檢測能力和數(shù)據(jù)分析功能，為分子生物學研究提供了可靠的技術平臺。

這款設備可以實時監(jiān)測PCR擴增過程中熒光信號的變化，幫助研究人員動態(tài)、定量分析目標基因的表達或突變狀態(tài)。無論是基礎研究還是臨床診斷，LightCycler® 480 II都能夠為科學家提供高效、穩(wěn)定和可靠的數(shù)據(jù)支持。

二、技術特點

1. 高性能光學檢測系統(tǒng)

LightCycler® 480 II配備高靈敏度光學模塊，支持多通道熒光檢測，可對多個目標基因進行同時監(jiān)測。

• 高靈敏度檢測：適合低豐度基因的分析，可靈敏檢測低拷貝數(shù)樣本。

• 多通道支持：支持多達5種熒光染料的同時檢測，適合多重PCR實驗。

• 熒光染料兼容性：支持SYBR Green、TaqMan探針、EvaGreen以及其他常見熒光標記物。

2. 快速熱循環(huán)技術

LightCycler® 480 II采用高效熱循環(huán)模塊，能夠快速升溫和降溫，大幅度縮短PCR實驗時間，提高檢測效率。

• 快速反應速度：每次實驗的反應時間顯著縮短，同時保持較高的擴增效率。

• 精確溫控系統(tǒng)：溫控精度達到±0.1°C，確保PCR擴增的高穩(wěn)定性和重復性。

3. 多通量配置

該儀器支持兩種孔板配置，滿足不同實驗室規(guī)模需求：

• 96孔板：適合中等規(guī)模實驗和科研使用。

• 384孔板：為高通量實驗設計，支持大規(guī)模篩查和復雜檢測。

4. 智能數(shù)據(jù)分析

LightCycler® 480 II配備功能全面的數(shù)據(jù)分析軟件，能夠滿足用戶的多樣化數(shù)據(jù)處理需求。

• Ct值分析：快速、準確地識別循環(huán)閾值（Ct值），提供可靠的擴增曲線。

• 熔解曲線分析：用于擴增反應的特異性驗證，幫助識別非特異性產(chǎn)物或污染。

• 絕對與相對定量：支持基于標準曲線的絕對定量以及2^-ΔΔCt法的相對定量分析。

• 突變檢測和基因分型：支持高分辨率熔解曲線（HRM）分析，用于基因突變檢測和基因分型研究。

5. 靈活性與兼容性

LightCycler® 480 II儀器設計靈活，適應多種實驗類型和需求：

• 多種反應模式：支持標準PCR、實時定量PCR、多重PCR、熔解曲線分析等。

• 兼容不同實驗條件：支持多種熒光標記體系和反應方案。

• 自動化擴展：可與實驗室自動化設備集成，進一步提高實驗效率。

三、核心功能

1. 基因表達分析

LightCycler® 480 II能夠?qū)崟r監(jiān)控基因表達水平的變化，適用于各種基因表達研究場景。

• 相對定量：對樣本間基因表達水平差異進行分析。

• 絕對定量：通過標準曲線直接計算基因拷貝數(shù)。

2. 突變檢測

該儀器可以靈敏檢測低頻率突變，適用于點突變、插入/缺失突變等多種基因突變類型的研究。

• HRM分析：高分辨率熔解曲線技術能夠高效區(qū)分樣本中的突變和野生型序列。

• 單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測：快速準確識別樣本中的特定基因變異。

3. 基因分型

LightCycler® 480 II支持基因分型實驗，通過分析熒光信號，對樣本進行遺傳多態(tài)性分型。

4. 拷貝數(shù)變異（CNV）分析

通過定量PCR實驗，該儀器能夠檢測基因組中目標基因的拷貝數(shù)變化，幫助研究拷貝數(shù)擴增或缺失的基因。

5. 病毒載量檢測

LightCycler® 480 II被廣泛應用于病毒載量分析，通過定量檢測病毒核酸，監(jiān)測感染狀況和治療效果。

四、技術參數(shù)

以下為LightCycler® 480 II的主要技術參數(shù)：

五、儀器優(yōu)勢

1. 高靈敏度與高通量

LightCycler® 480 II具檢測靈敏度和高通量能力，可同時處理大批量樣本，顯著提高實驗效率。

2. 多功能性

該儀器支持多種實驗類型，包括基因表達分析、基因分型、突變檢測和拷貝數(shù)分析等，覆蓋了絕大多數(shù)PCR應用場景。

3. 操作簡便

儀器的設計注重用戶體驗，配套軟件界面直觀，實驗設置和數(shù)據(jù)分析簡便易用。

4. 實驗結(jié)果可靠

高精度的溫控系統(tǒng)和靈敏的光學模塊確保了實驗結(jié)果的準確性和可重復性。

5. 靈活的擴展能力

兼容多種耗材和反應方案，支持與自動化工作站集成，適應不同實驗室的需求。

六、應用領域

LightCycler® 480 II在多個領域得到了廣泛應用：

1. 基礎研究

• 基因表達調(diào)控研究

• 基因功能研究

• 遺傳多樣性分析

2. 醫(yī)學研究

• 腫瘤標志物檢測

• 遺傳疾病相關基因分析

• 病毒載量檢測和病原體定量

3. 藥物開發(fā)

• 藥物基因組學研究

• 個體化醫(yī)療相關基因研究

• 藥物代謝相關基因分型

4. 工業(yè)檢測

• 食品安全檢測中的病原體分析

• 環(huán)境樣本中的微生物檢測

七、總結(jié)

賽默飛LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR儀憑借其高靈敏度、多通道檢測、快速熱循環(huán)技術和強大的數(shù)據(jù)分析能力，成為分子生物學和基因組學研究中的重要工具。它不僅能夠滿足基礎科研需求，還在臨床和工業(yè)檢測領域發(fā)揮了重要作用。

無論是小規(guī)模實驗還是大規(guī)模高通量篩查，LightCycler® 480 II都能夠為用戶提供可靠的結(jié)果和高效的實驗體驗，為基因研究和診斷提供全面的技術支持。